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3D灌流培養(yǎng)一般的使用流程如下

更新時間:2023-07-13      點擊次數(shù):1598
  3D灌流培養(yǎng)是一種細胞培養(yǎng)技術,其主要作用是在三維環(huán)境中模擬體內組織和器官的生理條件,以提高細胞生長、分化和功能表達。通過提供細胞所需的氧氣、營養(yǎng)物質和廢棄物的排出,模擬體內的血液循環(huán)環(huán)境。其主要特點包括:
  1.三維支架:提供細胞附著和生長的支撐結構,通常由生物可降解的材料制成。
  2.灌流系統(tǒng):通過灌注培養(yǎng)液,維持三維結構內的流動,以促進營養(yǎng)物質的輸送和廢棄物的清除。
  3.細胞分布均勻性:灌流培養(yǎng)系統(tǒng)可以確保細胞在整個三維結構中均勻分布,從而模擬更真實的組織環(huán)境。
  4.力學刺激:通過調節(jié)灌注速度和流體剪切力等參數(shù),可以模擬體內組織受到的力學刺激,如血流和機械壓力。
  5.長期培養(yǎng):與傳統(tǒng)的二維培養(yǎng)相比,灌流培養(yǎng)提供更穩(wěn)定、更持久的細胞培養(yǎng)環(huán)境,適用于長時間的實驗和觀察。
  3D灌流培養(yǎng)一般的使用流程:
  培養(yǎng)基準備:根據(jù)實驗要求,準備適當?shù)呐囵B(yǎng)基,包括營養(yǎng)物質、生長因子等。確保培養(yǎng)基的配制正確,并進行無菌過濾以確保無菌狀態(tài)。
  細胞或組織準備:根據(jù)研究目的,選擇需要培養(yǎng)的細胞或組織,并進行必要的處理,如細胞分離、組織切割等。確保細胞或組織的純度和活性。
  3D培養(yǎng)裝置準備:準備好灌流培養(yǎng)所需的培養(yǎng)器具,如培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿、生物反應器等。確保裝置的清潔和無菌狀態(tài)。
  構建3D培養(yǎng)結構:根據(jù)實驗設計,將細胞或組織放置在3D培養(yǎng)裝置中,如培養(yǎng)皿、生物反應器等。可以使用支架、基質或其他輔助材料來構建和支撐3D培養(yǎng)結構。
  灌流培養(yǎng)操作:將預先準備好的培養(yǎng)基加入到3D培養(yǎng)裝置中,確保培養(yǎng)結構被培養(yǎng)基覆蓋。使用灌流裝置,通過調節(jié)流速和壓力,實現(xiàn)培養(yǎng)基在3D培養(yǎng)結構中的流動。根據(jù)實驗要求,可以調整灌流速度、時間和壓力等參數(shù)。
  培養(yǎng)條件控制:將3D培養(yǎng)裝置放置在合適的培養(yǎng)箱或生物反應器中,維持適宜的培養(yǎng)條件,包括溫度、濕度和二氧化碳濃度等。根據(jù)實驗要求,可以對培養(yǎng)條件進行調節(jié)。
  培養(yǎng)觀察和維護:定期觀察和評估3D培養(yǎng)結構的生長和發(fā)育情況。根據(jù)需要,可以進行培養(yǎng)基的更換、細胞或組織的采樣、細胞增殖或分化的調控等操作。
  實驗結束和分析:根據(jù)實驗設計,確定實驗結束的時間點,并進行樣本采集和分析??梢允褂酶鞣N細胞和組織學技術、分子生物學技術等進行結果評估和數(shù)據(jù)分析。
 

3D灌流培養(yǎng)

 

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